《2020版中國(guó)藥典》新增指導(dǎo)通則“細(xì)菌 DNA 特征序列鑒定法（征求意見稿”解析與儀器配置方案

• 指導(dǎo)通則信息

1. 指導(dǎo)通則號(hào)：尚未公布
2. 指導(dǎo)通則名稱：細(xì)菌 DNA 特征序列鑒定法
3. 征求意見稿發(fā)布時(shí)間：2018年8月23日
4. 公示單位：國(guó)家藥典委員會(huì)

• 檢測(cè)項(xiàng)目解析

    指導(dǎo)通則前言：細(xì)菌DNA特征序列鑒定法系以特征核酸序列作為目標(biāo)檢測(cè)物，

用于藥用原料、輔料、制藥用水、中間產(chǎn)品、終產(chǎn)品（制劑）、包裝材料和環(huán)境等藥

品全生命周期質(zhì)量控制中細(xì)菌的鑒定。

    指導(dǎo)通則正文“待檢菌測(cè)定”部分，共涉及七個(gè)流程：分離純化、核酸提取、核酸

擴(kuò)增、核酸擴(kuò)增產(chǎn)物的檢測(cè)、核酸擴(kuò)增產(chǎn)物的純化、核酸測(cè)序、結(jié)果判定。其中，

在“核酸提取環(huán)節(jié)”質(zhì)量測(cè)定部分，提出要求如下：

    待檢菌提取的核酸質(zhì)量應(yīng)能滿足核酸擴(kuò)增的要求。采用紫外分光光度法測(cè)定模板

DNA的濃度和純度，應(yīng)能夠滿足后續(xù)測(cè)試的要求，核酸濃度不宜低于10ng/μL，

A₂₆₀/A₂₈₀比值宜在1.8~2.0之間。

    在應(yīng)用紫外分光光度法做核酸質(zhì)量測(cè)定項(xiàng)目時(shí)，紫外分光光度計(jì)及附件配置要求如下：

1.常規(guī)紫外分光光度計(jì)

2.微量比色皿，容積一般在100μL左右，光程為10mm

3.核酸濃度梯度：1~5μmol/L（5~25μg/m L，堿基對(duì)13個(gè)，雙鏈）

• 儀器配置方案

    根據(jù)指導(dǎo)通則解析內(nèi)容，藥品生產(chǎn)企業(yè)可能會(huì)采購(gòu)紫外分光光度計(jì)來(lái)應(yīng)對(duì)新版藥

典的實(shí)施，推薦以下配置方案：

• 紫外可見分光光度計(jì)主機(jī)

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• 微量樣品池架

主要用途：配合微量比色皿使用，可以提高微量樣品的測(cè)量精度。

作用：微調(diào)樣品池位置，盡可能使測(cè)量光束大限度通過(guò)微量比色皿的通光孔，提高微量樣品的測(cè)量精度。

MH181-1 型微量樣品池架（適用于TU-18系列）

MH19-1 型微量池架（適用于TU-19系列）

• 微量比色皿

石英側(cè)開孔微量比色皿

石英單側(cè)壁微量池